上海精宏DHG-9076A在慢性肾衰竭大鼠肾功能分析的

慢性肾功能衰竭为多种慢性肾脏病缓慢恶化发 展的最终结果，由于其临床症状可引发多方面并发 症，而且病理基础复杂，导 致 死 亡 率 逐 年 攀 升，透析清除肾内代谢废物和肾移植可显著降 低患者死亡率，延长生命周期，但前者技术复杂， 费用高昂，并发症多，次数过于频繁; 后者需要等 待合适的肾源等。核转录因子信号通路能调控 核内相应靶基因进行转录或表达，影响炎症介质合 成，诱导炎症反应，导致肾脏损害及肾纤维化，慢 性肾功能衰竭大多与肾功能炎症相关，进一步加重 衰竭进展。

1 材料

1. 1 药材

冬瓜皮购于赣州益丰大药房医药连锁 有限公司，经江西中医药大学中药鉴定教研室吴启 南教授鉴定为葫芦科植物冬瓜 Benincasa hispida ( Thunb．) Cogn． 的干燥果皮。采用烘箱加热制炭， 即将冬瓜皮放到托盘上 ( 平铺 1 cm) 置于烘箱中， 制炭温度 280 ℃，制炭时间 15 min，粉碎，取＜80 目、＞100 目的细粉，用时加双蒸水配制成 3%、 4. 5%、6%混悬液。

1. 2 动物

SPF 级 Wistar 雄性大鼠 72 只，体质量 160～180 g，由南方医科大学动物中心提供，动物 使用许可证号 SYXK ( 粤) 2016-0167。

1. 3 试剂

腺嘌呤 ( 上海索宝科技有限公司，批 号 A8330) ，用时加蒸馏水配制成 2. 5%混悬液，置 于 4 ℃ 冰箱中，混匀后使用; 肌酐试剂盒 ( 批号 D170214) 、尿素氮试剂盒 ( 批号 L160333) ( 上海 复星长 征 医 学 科 学 有 限 公 司) ; TGF-β1、PAI-1 ELISA 试剂盒 ( 南京建成生物工程研究所，批号 150321、160088) ，NF-κB p65 兔抗大鼠一抗 ( abcam) 。爱西特 ( 药用炭片，河北长天药业有限公 司，国药准字 H13022797) 。

1. 4 仪器

DHG-9076A电热恒温鼓风干燥箱 ( 上海精宏实验设备有限公司) ; Bio-Ｒad 680 酶标仪、 PCＲ 仪、凝胶成像系统 ( 美国 Bio-Ｒad 公司) ; 移 液器、高 速 低 温 离 心 机 ( 德 国 Eppendorf 公 司) ; Labcycler 定量 PCＲ 扩增仪( 德国 SensoQuest 公司) 。

2 方法

72 只大鼠随机取 12 只作为正 常组，灌胃给予 250 mg /kg 蒸馏水; 其余大鼠灌胃 给药 250 mg /kg 2. 5%腺嘌呤混悬液，第 1～14 天每 天 1 次，第 15～28 天隔天 1 次。第 29 天，将造模 大鼠随 机 分 为 模 型 组、爱 西 特 组 ( 450 mg /kg ) 及冬瓜 皮 炭 低、 中、 高 剂 量 组 ( 300、 450、 600 mg /kg) 。造 模 结 束 后，爱西特组大鼠按 450 mg /kg剂量灌胃，冬瓜皮炭高、中、低剂量组 大鼠分别按 600、450、300 mg /kg 剂量灌胃; 正常 组、模型组大鼠按等体积蒸馏水灌胃，制作大鼠体 质量 ( g) 与给药量 ( mL) 对照表，每 2 d 称 1 次 体质量，按其变化增减给药量，持续 15 d，其间大 鼠自由摄食、饮水。第 15 天给 药 1 h 后，各 组 大 鼠 用 1% 戊 巴 比 妥 钠 ( 0. 01 mL /g) 麻醉，腹主动脉取血5 mL，3 000 r/min 离心 15 min，分离血清，按 ELISA 试剂盒说明书 步骤检测 BUN、SCr、TGF-β1、PAI-1 水平。取大鼠肾脏作石蜡切片， 分别进行 HE 染色 ( 苏木素染色液染色 10 min，浸 入自来水中洗去多余染色液，约 10 min，蒸馏水再 洗涤 1 次，95% 乙醇 浸 泡 5 s，伊红染色液染色 2 min) 、Masson 染色，光镜下观察大鼠肾组织病 理形态变化。

3 结果

模型组大 鼠局灶性间质纤维化，大量炎细胞浸润，肾间质重 度纤维化增生，肾小囊腔明显扩张; 爱西特组、冬 瓜皮炭高剂量组大鼠肾小管轻度扩张，肾小管上皮 细胞轻度空泡样变性，肾间质轻度纤维化，肾间质 可见少量炎细胞浸润，肾小囊腔轻度扩张，其中后 一组囊腔扩张程度更低，组织学变化更少。模型组大鼠肾小管肾间质重度纤维化，扩张肾 小管严重; 冬瓜皮炭高剂量组大鼠肾间质轻度纤维 化，肾小管、肾小囊腔轻度扩张。

4 讨论

慢性肾功能衰竭可对肾组织产生漫长性、进行 性的实质性、功能性损害，从而导致不同组织、生 化、内分泌等全身代谢紊乱组成的临床综合征，具 有不可逆转的特征，症状包括肾小球滤过率下降肾脏代谢发生紊乱，最终诱发终末期肾病和肾功能 进一步恶化，患者需要终身依赖肾脏透析或肾脏移 植才能获得生存的权利，我国成年人中发病率达 10. 8%，需要及时预防和诊治。



 

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