消肿抗炎疗效的实验研究（精宏DNP-9162使用）

痛风是一种因嘌呤代谢紊乱及( 或) 尿酸排泄减少的晶 体相关性关节病，尿酸晶体沉积在关节内和关节周围的 空间，并激活先天免疫系统。降低尿酸盐治疗是治疗本病 的基石，当血清尿酸盐明显下降后，急性痛风发作的风险明 显降低。蠲痹历节清方在急性痛风性关节炎的临床治疗 中发挥了一定的功效，但具体作用机制尚不明确。本实验 通过采用高蛋白饮食的方法( 饮食中的蛋白含量为 50% ) 建 立鸡痛风性关节炎模型，探讨蠲痹历节清方治疗痛风的作 用机制。

1 实验材料

1. 1 动物

30 日龄 SPF 级健康雄性湘黄鸡 48 只，体质量 ( 500 ± 50) g，由湖南中医药大学动物实验中心代购，合格证 号: 2017 － 0004。本实验通过湖南中医药大学医学实验动物 伦理委员会批准。

1. 2 药物及试剂

蠲痹历节清方药物组成: 苍术 20g，黄芩 10g，黄柏 10g，防己 10g，土茯苓 15g，茵陈 15g，泽泻 10g，白 术 10g，当归 15g，甘草 6g。生药购自湖南中医药大学第二附 属医院，由湖南中医药大学药学院统一煎制、浓缩至含生药 0. 83g /ml，4℃保存; 别嘌醇片( 广东彼迪药业有限公司，批 号: H44021368) ，以蒸馏水配置成 1. 95mg /ml，4℃保存; 水合 氯醛( 天津科密欧化学试剂有限公司，批号: 20140303) 。

1. 3 主要仪器

JY3002 型电子天平( 上海精密科学仪器有限公司) ; Shandon325 型石蜡切片机( Shandon 公司) ; LEICA DM LB2 型双目显微镜( LEICA 公司) ; HHS － 2 电子恒温不 锈钢水浴锅( 上海南阳仪器有限公司) ; MIAS 医学图像分析 系统( 北航公司) ; Haier 医用微波炉( Haier 集团) ; S2 － 93 自 动双重纯水蒸馏器( 上海亚荣生化仪器厂) ; 精宏DNP-9162 型 电热恒温培养箱( 上海精宏实验设备有限公司) ; Motic B5 显微摄像系统( 麦克奥迪实业集团公司) 。

2 实验方法

2. 1 动物分组及模型制备

采用随机数字表法将 48 只湘 黄鸡随机分为正常组、模型组、蠲痹历节清方组及别嘌醇 组，每组 12 只。正常组以正常饲料( 蛋白含量 19. 8% 、钙含 量 5% ) ，湖南省农科院畜牧所饲料厂提供，批号: 20170803) 喂养，其余 3 组按照相关制备急性痛风性关节炎模 型，方法: 以模型饲料喂养( 以 15kg 为 1 个基本单位，含鱼粉 12. 50kg、石粉 2. 50kg、蛋白含量 50% 、钙含量 9. 17% ) 。所有 动物均保证每天食量，每天饮水量≤100ml，连续喂养 21d。

2. 2 给药方法

自造模结束后第 1 天开始给药，蠲痹历节 清方给予蠲痹历节清方汤剂( 30ml /kg) 灌胃，别嘌醇组给予 别嘌醇( 15ml /kg) 灌胃，其余2 组均以等体积 0. 9% 氯化钠注 射液灌胃，每天 2 次，共 21d。

2. 3 观察指标

参考刘海姣等的测量方法，采用缚线法 测量踝关节周径，分别于造模前及药物干预后 1、7、14、21d5 个时相点测量各组鸡左后足踝关节三叉处外部绕踝关节 的周径，测量 2 次后取平均值为周长，并根据公式计算膝关 节肿胀指数。膝关节肿胀指数 = ( 造模后周长 － 造模前周 长) /造模前周长。末次给药 30min 后，将鸡翅展开以暴露翼 根的静脉，并将血管垂直穿刺采血 1ml，加 10μL EDTA 抗 凝，显微镜下读取 200 个白细胞，统计白细胞、淋巴细胞、中 性粒细胞数量。

2. 4 统计学方法

采用 SPSS 17. 0 软件进行统计分析，实 验数据以均数 ± 标准差( x ± s) 表示，组间比较采用单因素 方差分析，组间两两比较采用 LSD － t 检验。P ＜ 0. 05 为差 异有统计学意义。

3 实验结果

干预 1d，与正常组相比，模型组、蠲痹历节清方组及别嘌醇组鸡 踝关节肿胀指数上升，差异有统计学意义; 干预 7、14、21d， 与模型组相比，蠲痹历节清方组及别嘌醇组鸡踝关节肿胀 指数下降，差异均有统计学意义; 干预 21d，蠲痹历节清方组 与别嘌醇组鸡踝关节肿胀指数差异无统计学意义。与正常组相比，模型组鸡血液中的白细胞、淋巴细胞 和中性粒细胞数量均升高，差异有统计学意义; 与模型组相 比，蠲痹历节清方组及别嘌醇组鸡的白细胞、淋巴细胞和中 性粒细胞数量均下降，差异有统计学意义。

4 讨 论

急性痛风性关节炎发病急骤，常表现为关节及周围组 织红肿热痛，且伴活动受限，常常持续 1 周余。临床广泛应 用皮质类固醇、别嘌呤醇、非甾体抗炎药等西药治疗急性痛 风性关节炎，但均有不同程度的毒副作用，如胃肠道反应、组织器官损害等。近年来，IL － 1Ｒ 拮抗剂广泛应用于对秋 水仙碱和非甾体类抗炎性药物的禁忌证患者，但其作用机 制尚不清楚，也未提及其毒副作用。元代朱丹溪在《格致余 论》中首次提出“痛风”的病名，其病因各代医家多责之湿热 之邪，常治以清热利湿法，如四妙散、宣痹汤、针刺与 中药结合治疗等。



 

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