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精宏鼓风干燥箱对膝骨性关节炎家兔关节滑膜组

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-09-09 09:39【
骨性关节炎( OA) 是骨伤科最常见的疾病,随 着我国人口老龄化趋势加速,骨性关节炎的患者也 逐年增加,其中膝关节是骨性关节炎最常见最多发 病的部位。随着病情发展,引起的直接后果就是 活动受限,丧失劳动力,严重者可导致残废。蒙药 森登 - 4 味汤由文冠木、诃子、栀子、川楝子等药味 组成,有着清热燥黄水的功能,主治痛风、痹病、关 节黄水病、关节水肿等,在临床上广泛用于治疗关 节炎及水肿等病症。

1 材料

1. 1 动物

健康成年家兔 70 只,清洁级,雌雄不 限,体质量( 2. 5 ± 0. 2) kg,由长春亿斯实验动物技 术有限公司提供,实验动物许可证号: SCXK( 吉) 2016 - 001。适应性喂养 1 周。

1. 2 药品与试剂

森登 - 4 味汤: 由文冠木、诃子、 栀子、川楝子等药味组成,内蒙古民族大学附属医 院制剂室制备成散剂,加 50 mL 蒸馏水制成混悬液 备用。白介素 - 1β、肿瘤坏死因子 - α、转化生长因 子 - βELISA 检测试剂盒: 上海源叶生物技术有限公 司; 戊巴比妥钠: 上海化学试剂有限公司。

1. 3 主要仪器

AUY - 120 电子天平( max 201g d = 0. 01mg) : 日本岛津公司; TG16 - WS 台式离心机: 长沙湘瑞离心机有限公司; DY89 - 1 电动匀浆 机: 宁波电子科技有限公司; Sunrise M7. 2 型多功能 酶标仪: 美国 Molecular Devices; 上海精宏DHG-9140A恒温干燥箱: 上海精宏实验设备有限公司; 冰箱: 青岛海尔公司。

2 方法

80 只成年家兔恒温恒湿条 件下适应性喂养 7 d 后,随机选取 64 只家兔采用改 良 Hulth 法进行动物模型制造,其余 16 只做正常 对照组。实验家兔称重,编号,用 30 g /L 戊巴比妥 钠耳缘静脉注射麻醉( 30 mg / kg) 后,将兔固定于手 术台上,双膝伸直位。常规剃毛、消毒、铺巾。于兔 右侧膝关节髌内侧作长约 2. 5 cm 的纵行皮肤切口, 切断内侧副韧带,完整摘除内侧半月板,切断前交 叉韧带。建模时注意保护关节软骨面不受损伤; 彻 底止血,逐层缝合,常规消毒包扎。术后 1 周肌注青 霉素 40 万 U / d,以防感染。之后进行每天 3 次驱 赶,每次驱赶时间至少 30 min,4 周后经检查关节软 骨面粗糙、软骨外观呈灰黄色、无正常透明度及光 泽可见明显缺损及骨赘形成,显示动物模型制造成 功。将成模大鼠随机分为 4 组,模型组和森登 - 4 味汤高( 45 mg / kg) 、中( 30 mg / kg) 、低剂量( 15 mg / kg) 组,每组 16 只,各组给予相应计量灌胃给药, 模型组、正常组蒸馏水灌胃,每天 1 次,连续给药 28 d。末次给药后 24 h,处死( 空气栓塞法) 家 兔,在无菌条件下,用剪刀自股骨下段及胫骨上段 分别剪取完整膝关节,切开关节,显露膝关节腔,肉 眼观察关节软骨的颜色、光泽、光滑度、滑膜充血肿 胀等情况,然后取关节滑膜组织,进行组织匀浆,用 酶联免疫法检测白细胞介素( IL - 1β) 、肿瘤坏死因 子( TNF - α) 、转化生长因子( TGF - β) 含量,操作 严格按试剂盒说明进行。

3 结果

正常对照组家兔随 饲养时间的增长,精神状态良好,被毛光泽,行动自 如,无异常状态。造模成功家兔精神萎靡,不喜活 动,进食及饮水量均减少,被毛干枯且无光泽,活动 量明显减少; 膝关节出现轻微的炎症反应及关节部 位出现肿胀,陆续出现出现关节全部水肿且伴有关 节活动功能障碍情况,出现关节红肿和软组织肿 胀,随之逐渐消退,关节部位僵硬,活动明显受限, 不爱活动。森登 - 4 味汤给药组较模型组病情有所 好转,进食及饮水均增加,体质量有所增加,精神状 态良好,被毛变光泽,行动转好。