隔水式恒温培养箱使用于六种中成药细菌数的检

为了进一步阐明《中国药典》 2015 年版在微生物限度检查中需氧菌总数计数上 所具备的优势以及特点，本文采用了六种中成药( 新癀片、海珠喘息定片、八宝丹锭剂、通脉降脂胶 囊、大七厘散和六味地黄丸) 分别按照《中国药典》 2010 年版中细菌计数法和《中国药典》2015 年版 需氧菌总数计数法进行方法学的验证和建立，比 较两版药典在此类微生物检测方法以及结果上的 不同，用以阐述《中国药典》2015 年版在检测方法 上的优点，同时指出用改进方法进行检测时所需 要注意的问题，以更好地适应新版药典的规定和 实施。

GNP-9270 型隔水式恒温培养箱( 上海精宏实验设备有限公司) ; CTHI-250B 型恒温恒湿箱( 上海施都凯) 、MSC18 型生物安全柜( 赛默飞世尔科技有限 公司) ; HTY-602 型智能集菌仪( 杭州泰林生物技术 器械有限公司) 。

新 癀 片 ( 规 格: 0. 32 g /片，批 号: 140910、 150504、150506) ; 海珠喘息片( 规格: 0. 48 g /片，批 号: 150801 ) ; 八 宝 丹 锭 剂 ( 规 格: 3 g /粒，批 号: 140201、150101、150102) ; 通脉降脂胶囊( 规格: 0. 42 g /粒，批号: 150101) ; 大七厘散( 规格: 1. 5 g /袋，批 号: 150701、150702、150703 ) ; 六 味 地 黄 丸 ( 批 号: 150420) 均由厦门中药厂有限公司提供。

金黄色葡萄球菌〔CMCC( B) 26 003〕、大肠埃希 菌〔CMCC( B) 44 102〕、枯草芽孢杆菌〔CMCC( B) 63 501〕、铜绿假单胞杆菌〔CMCC( B) 10 104〕、白色念 珠菌〔CMCC ( F) 98 001〕、黑 曲 霉〔CMCC ( F) 98 003) 均由中国食品药品检定研究院中国医学细菌 保藏管理中心提供。

营养琼脂、胰酪大豆胨琼脂培养基( TSA) 、胰酪 大豆胨液体培养基( TSB) 、pH 7. 0 无菌氯化钠-蛋白 胨缓冲液均由北京三药科技开发有限公司提供，培 养基适用性试验结果均符合规定。

取新癀片 10 g，( 研磨) ，加 pH 7. 0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 100 mL，置于45 ℃水浴，混匀，制成 1∶ 10 供试液。其余五种药物 的供试液均采用上述方法进行配制，均制成 1∶ 10 供 试液，备用。( 平皿法: 取上述供试液 1 mL( 或 0. 2 mL 或 0. 1 mL) 和上 述 菌 液 1 mL ( 含 试 验 菌 50 ～ 100 cfu) ，分别注入平皿，立即倾注营养琼脂培 养基，每株试验菌平行制备 2 个平皿，按平皿法测定 其菌数。分别取海珠喘息定片、通 脉降脂胶囊、大七厘散、六 味 地 黄 丸 各 10 g，( 研 磨) ，加胰酪大豆胨液体培养基至 100 mL，置于 45 ℃ 水浴，混匀，制成 1∶ 10 供试液，备用。分别取新 癀片、海珠喘息定片、八宝丹锭剂各 10 g，研磨，加 胰酪大豆胨液体培养基至 100 mL，置于 45 ℃ 水 浴，静置 10 min，弃粗渣，收集剩余混悬液，制成 1∶ 10 供试液，备用。再按照试验要求，用 1 ∶ 10 供试 液稀释成 1∶ 20 或 1∶ 50 或 1∶ 100 或 1∶ 200 的供试 液，备用。取 TSB 代替供试液，按上述试验组 同法操作加入试验菌液并进行相应微生物回收试验。液以稀释液代替菌液同试验组操作。

由于两版药典回收率的表现形式不同，2010 版 为百分数形式，2015 版为比值形式，为了方便比较， 本文将“2. 2. 6”中 2015 版的回收率比值也按照回 收率的表现形式换算，同时为了简化表格，便于数据 分析比较。

八宝丹锭剂 按《中国药典》2015 年版药典薄膜法要求试验发 现冲洗 1 000 mL·膜 － 1 金黄色葡萄球菌的回收率 仍达不到 50% ，为了避免微生物受损，改按《中国 药典》2010 年版薄膜法试验。由表 7 可知: 1、六味 地黄丸、通脉降脂胶囊两版药典建立的检测方法 均为平皿法，采用稀释级也基本一致; 2、海珠喘息 定片、大七厘散、八宝丹锭剂、新癀片《中国药典》 2015 年版药典建立的检测方法比 2010 版在稀释 级别上均有不同程度的提高，而且海珠喘息定片、八宝丹锭剂、新癀片《中国药典》2015 年版试验过 程中不仅稀释级别提高甚至需要通过静置弃粗渣 的方法来消除药品的抑菌性。



 

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