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肽分离纯化(精宏DHG-9140A应用)

返回列表 来源:未知 发布日期:2020-05-19 09:56【

1 材料与方法


FZ102-SIM真空冷冻干燥设备,德国西门子公司; FSH-2A 可调高速匀浆乳化机,金坛市医疗仪器厂; THZ-82 恒温振荡器,常州国华电器有限公司;TDL5-A 离心机,上海安亭科学仪器厂;DHG-9140A 型 电热恒温鼓风干燥箱,上海精宏实验设备有限公司。取葵花籽粕蛋白(纯度 66.94 % ± 0.24 %), 经7 %碱性蛋白酶酶解(溶液pH8、水浴温度55 ℃、 酶解时间 2 h)、冷冻干燥,得到 ACE 抑制肽,其 ACE 抑制率为 85.49 %± 0.80 %。


2 结果与分析


在几组上样流速中,上样流速 对吸附率有比较明显的影响,选择 2 BV/h 的上样 流速为宜。一般来说,被吸附物质通过树脂越缓慢, 和树脂接触越充分,继而可更好地吸附在树脂上, 但效率会随之下降。如树脂已与样品充分接触,则 继续降低流速,吸附率便不会提高。对于一定量的洗脱液,如加快洗脱流速,则洗 脱液与吸附在树脂上的样品作用的时间缩短,那么 在洗脱液对葵花籽粕 ACE 抑制肽的溶解还未达到 饱和时就已经达到一种动态平衡,使之从吸附床上 流出。


3 结论


葵花籽粕 ACE 抑制肽分离纯化最适工艺为乙 醇浓度 70 %、上样 pH 5、上样流速 2 BV/h、洗脱 流速 2 BV/h,得率为 93.26 %,纯化后的葵花籽粕 ACE 抑制肽抑制率为 92.23 % ± 0.48 %。葵花籽粕 ACE 抑制肽对热和金属离子均具有良好的稳定性。 模拟体内消化试验显示,在胃蛋白酶的存在下,葵 花籽粕 ACE 抑制肽抑制率为 92.03 % ± 1.22 %,在 胃蛋白酶和胰蛋白酶同时存在时,葵花籽粕 ACE 抑制肽的抑制率为 91.49 % ± 1.74 %,表明葵花籽 粕 ACE 抑制肽的活性几乎不受胃肠蛋白酶的影响, 可以很好作用于靶组织。






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