肽分离纯化（精宏DHG-9140A应用）

1 材料与方法

FZ102-SIM真空冷冻干燥设备，德国西门子公司； FSH-2A 可调高速匀浆乳化机，金坛市医疗仪器厂； THZ-82 恒温振荡器，常州国华电器有限公司；TDL5-A 离心机，上海安亭科学仪器厂；DHG-9140A 型 电热恒温鼓风干燥箱，上海精宏实验设备有限公司。取葵花籽粕蛋白（纯度 66.94 % ± 0.24 %）， 经7 %碱性蛋白酶酶解（溶液pH8、水浴温度55 ℃、 酶解时间 2 h）、冷冻干燥，得到 ACE 抑制肽，其 ACE 抑制率为 85.49 %± 0.80 %。

2 结果与分析

在几组上样流速中，上样流速 对吸附率有比较明显的影响，选择 2 BV/h 的上样 流速为宜。一般来说，被吸附物质通过树脂越缓慢， 和树脂接触越充分，继而可更好地吸附在树脂上， 但效率会随之下降。如树脂已与样品充分接触，则 继续降低流速，吸附率便不会提高。对于一定量的洗脱液，如加快洗脱流速，则洗 脱液与吸附在树脂上的样品作用的时间缩短，那么 在洗脱液对葵花籽粕 ACE 抑制肽的溶解还未达到 饱和时就已经达到一种动态平衡，使之从吸附床上 流出。

3 结论

葵花籽粕 ACE 抑制肽分离纯化最适工艺为乙 醇浓度 70 %、上样 pH 5、上样流速 2 BV/h、洗脱 流速 2 BV/h，得率为 93.26 %，纯化后的葵花籽粕 ACE 抑制肽抑制率为 92.23 % ± 0.48 %。葵花籽粕 ACE 抑制肽对热和金属离子均具有良好的稳定性。 模拟体内消化试验显示，在胃蛋白酶的存在下，葵 花籽粕 ACE 抑制肽抑制率为 92.03 % ± 1.22 %，在 胃蛋白酶和胰蛋白酶同时存在时，葵花籽粕 ACE 抑制肽的抑制率为 91.49 % ± 1.74 %，表明葵花籽 粕 ACE 抑制肽的活性几乎不受胃肠蛋白酶的影响， 可以很好作用于靶组织。

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