精宏水浴锅用于基因型分析

    拥 有 丰 富 多 样 的 S 基 因型。到目前为止，只是鉴定了其中的一部分， 还有很多梅品种资源的 S-RNase 基因型与 SFB 基因型以及新基因有待进一步鉴定和挖掘。本 研究拟采用 AS-PCR 技术鉴定梅 S-RNase 基 因 型、SFB 基 因 型 和 挖 掘 新 的 基 因，为 梅 授 粉 品 种 的 合 理 选 择 提 供 指 导，并 为 高 效 育 种 提 供 依据。上海复日科技公司生产的 FR200 紫外透射仪，购自上海净信事业发展有限公司 的多样品组织研磨仪 -24，北京市六一仪器厂 DYY6C 型琼脂糖凝胶电泳仪，上海精宏实验设备 DKS24 型恒温水浴锅，Eppendorf 5415D 型高速冷冻离 心 机，核 酸 蛋 白 分 析 仪（Eppendorf），Mastercycler nexus PCR 仪为 Eppendorf 公司生产的，C.B.S. 公司 DH-400-33 型电泳槽。

    使用引物 Pru-C2、PCE-R 对 11 个品种的叶片 DNA 进行 PCR 扩增，利用 1.5% 的琼脂糖胶观察 11 个梅品种扩增的 PCR 产物，发现每个品种均得 到了两条不同的目的条带。所有的目的条带 集中在 260~1836 bp，并且表现出一定的长度多态 性。至于这 11 个梅品种的 S-RNase 基因类型的确 定，还需要进一步的序列分析。运 用 DNAMAN 软件在核苷酸序列的基础 上，推 导 出 2 个新得到的 S-RNase 基因相对应的 氨基酸序列。对本次研究中鉴定出的各个梅品种 S-RNase 基因与 SFB 基因进行种内氨基酸序列比 对，分 别 得 到 56.52%~89.29%、73.99%~84.83% 的 同源性；而将其与其他李属植物的 S-RNase 基因 与 SFB 基因进行比对，则分别具有 58.57%~100%、 61.03%~97.20% 的 同 源 性。 如 PmS24- RNase 和 PsS24-RNase 之间具有 100% 的最大同源 性。整个进化树，SFB 基因种间同源性大于种内同 源性，如 PmSFB53 与 PdSFB13 之间具有 100% 的最 大同源性。这种现象说明 S-RNase 基因与 SFB 基因的多态性存在于李属植物的进化过程中。