正常小鼠免疫功能的分析（精宏DKB-501使用）

多糖是由多个单糖分子以糖苷键结合而成的天然大 分子化合物，广泛存在于动、植物及微生物体内，在抗肝 炎、抗病毒、抗肿瘤、抗心血管疾病、抗衰老、提高免疫力、 降糖等方面具有特殊的生物活性。灵芝、螺旋藻和锁阳 的主要活性成分之一均是多糖。如灵芝多糖能够增强肿瘤 小鼠巨噬细胞的吞噬功能，促进淋巴细胞增生，增强 T 杀 伤细胞的细胞毒作用，促进细胞因子如白细胞介素等；螺 旋藻多糖能增强小鼠骨髓细胞增殖能力，促进胸腺、脾脏等 免疫器官的生长和促进血清蛋白的生物合成；锁阳多糖能 提高衰老小鼠巨噬细胞吞噬能力和脾脏淋巴细胞转化能力。

1 材料与仪器 

1.1 实验动物 

健康昆明种雄性小鼠，8~10 周龄，体质量（20±2） g， 由兰州大学医学部实验动物中心提供。动物合格证号为: 甘医动字第 14-006。 1.2 仪器 DKB-501 数显超级恒温水浴锅 （上海精宏实验设备有限公司）；微量进样器（上海安亭微量进样器厂）；游标卡 尺（安徽量具刀具厂）；AL204 电子天平[梅特勒—托利多 仪器（上海）有限公司]；722 型可见光光度计（上海光谱仪 器有限公司）；DD5M 立式大容量离心机（湖南凯达科学仪 器有限公司）；SKJH-2112 超净工作台（上海苏坤实业有限 公司）；旋转蒸发仪；冷冻干燥机。 

1.3 材料与药品 

螺旋藻干粉、灵芝干粉、锁阳干粉，均由甘肃省微藻工 程技术研究中心提供；绵羊红细胞（SRBC）、豚鼠血清、小 牛血清均购自北京元亨金马生物科技开发有限 公 司）； 95%乙醇、氯仿、正丁醇、葡糖糖、5%苯酚、浓硫酸、氯化 钠、氯化钾、硫酸镁、氯化镁、氯化钙、磷酸氢二钠、磷酸二 氢钾、碳酸氢钠、柠檬酸钠均为分析纯。 1.4 方法与步骤 1.4.1 螺旋藻、灵芝、锁阳 3 味单味药的粗多糖提取 称取 螺旋藻、灵芝、锁阳干粉各 100 g，分别按料液比 1∶10 分别加 入蒸馏水浸泡 2 d，各加入 1 g 纤维素酶和 1 g 果胶酶，50 ℃ 水浴提取，过滤，离心 10 min，取上清液。循环提取 2 次，合并 上清液，减压浓缩，Sevage 法除蛋白，乙醇沉淀，真空冷冻干 燥，分别获得螺旋藻、灵芝、锁阳单味药的粗多糖干粉。 1.4.2 螺旋藻、灵芝和锁阳的复合粗多糖制备 采用硫 酸-苯酚法分别测定螺旋藻、灵芝、锁阳 3 味单味药的粗多 糖含量。螺旋藻粗多糖含糖量为 30.8%，灵芝粗多糖含糖 量为 44.9%，锁阳粗多糖含糖量为 40.9%。将分别制备的 螺旋藻粗多糖干粉、灵芝粗多糖干粉和锁阳粗多糖干粉，按 照多糖含量为 1∶1∶1 的比例制成复合多糖，4 ℃冷藏备用。 1.4.3 动物分组及给药 将小鼠按体质量随机分为 5 组，每 组 10 只，分别为正常对照组，螺旋藻多糖组（100 mg/kg·bw）， 复合粗多糖低剂量组（50 mg/kg·bw）、中剂量组（100 mg/kg·bw）、 高剂量组（200 mg/kg·bw），连续灌胃 21 d，正常对照组灌 胃生理盐水。

2 效果

与正常对照组相 比，螺旋藻多糖组与复合粗多糖组均可显著提高正常小鼠 的脾指数与胸腺指数（P<0.05），且随着复合粗多糖剂量的 增加，脾指数与胸腺指数呈剂量效应；复合粗多糖组与螺 旋藻多糖组比较，中剂量复合粗多糖组、高剂量复合粗多 糖组的脾指数与胸腺指数显著高于螺旋藻多糖组（P<0.05）， 低剂量复合多糖组脾指数与胸腺指数均略高于螺旋藻多 糖组，差异不显著（P>0.05）。表明粗多糖能提高小鼠的脾指数与胸腺指数，中剂量复合粗多糖、高剂量复合粗多糖 比单味药螺旋藻多糖效果更显著。

3 分析 

3.1 不同来源的多糖具有各自的生物活性

现代研究证 明，一些多糖共同作用时，效果比单一多糖更佳，药效呈现 协同性。目前，对复合多糖的研究主要集中在抗肿瘤及免 疫调节作用方面。 

3.2 分别灌胃单味药螺旋藻多糖以及螺旋藻、灵芝和锁阳 的复合多糖

均可可增加小鼠免疫器官指数，提高腹腔巨 噬细胞的吞噬功能，增强小鼠迟发型变态反应以及提高血 清半数溶血值。其机制可能因为多糖作为非特异抗原刺激小鼠淋巴细胞的增殖而提高机体细胞免疫和体液免疫功 能；通过促进腹腔巨噬细胞的增值和激活巨噬细胞的吞噬 功能，提高正常小鼠非特异性免疫功能。各指标均反映中 剂量、高剂量复合多糖组作用显著高于单味药螺旋藻多糖 组，与黄芪、酵母胞壁和虫草菌丝体复合多糖以及香菇、灵 芝、灰树花复合多糖的研究结果一致，可见复合多糖能 协同、高效地调节正常小鼠免疫机能。

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